血红蛋白电泳

血红蛋白电泳注意事项

微量血红蛋白电电泳:
①浸膜:将醋酸纤维素膜漂浮于TEB缓冲液表面,待其均匀浸透沉下后,至少20min才可使用。这样可防止产生气泡。
②点样:取出醋酸纤维薄膜用滤纸吸去多余的水份。用微量吸管吸取血红蛋白溶液置于多标本加样器的凹型槽内,以多标本加样器蘸取血红蛋白液,点样于醋酸纤维素膜无光泽面。距阴极端1.5~2cm处,点样量约3~5μl同时平行地点上正常血红蛋白溶液作对照。
③电泳:在微型电泳槽两侧缓冲液槽内分别加入等量的BB缓冲液,以二层滤纸做盐桥搭在醋酸纤维薄膜支架上。将膜无光泽面向下,点样端接负极,平衡5min。接通电源。电压180V,电流量约为0.2mA/cm膜宽,电泳时间20~30min。槽中缓冲液可在倒换电极后再用1次。
④染色:电泳后的薄膜放在丽春红染色液中染色10min左右取出,用3%醋酸漂洗数次,至背景呈白色,阴干。
⑤透明:将醋酸纤维素膜置透明液中浸湿,贴于洁净玻璃板上,用玻棒赶去二者之间的气泡。于一层析缸内倒少量冰醋酸,将玻璃板反盖在层析缸上(有薄膜面向内)。以挥发的冰醋酸熏10~20min,待膜透明即可取下。

血红蛋白电泳不宜人群

无禁忌人群。

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