北京中科白癜风医院
其他皮肤病医院国营
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蜡酸纤维薄膜电泳直接比色法:
试剂:同醋酸纤维素膜微量血红蛋白电泳。
操作:
(1)将醋酸纤维素膜作1/3切开(4cm×8cm)漫于TEB缓冲液中,10min以上。
(2)取出醋酸纤维素膜用滤纸吸去多余的水份。以Hb吸管吸取100g/L溶血液10μl均匀涂于玻璃推片下缘,在距薄膜阴极端1.5~2.0cm处于无光泽面点样。每个标本同时做两份。
(3)电泳:缓冲液同微量血红蛋白电泳。电压180V,时间40min~1h。(以各区带明显分开为宣)电泳后交换电极,缓冲液可反复使用。
(4)洗脱与定量分别剪下HbA,HbA2和相当于HbA2大小的对照区带。如有异常Hb区带(HbX)也同时剪下,各自放在相应的试管中。于HbA管中加TEB缓冲液10ml,其余各管加TEB缓冲液2ml,浸泡30min,时时振摇。待完全洗脱后。将
洗脱液混匀,用721分光光度计,波长413nm。以空白调零,测各管吸光度。
(5)计算:
如有异常HbX,则计算HbA2%时,分母中还要加:HbX吸光度。
HbX%=
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