流式细胞DNA分析

基本信息

  • 专科分类: 心血管
  • 检查分类: 血液检查
  • 适用性别: 男女均适用
  • 是否空腹:  非空腹
  • 手术参考价: 600元
  • 科 室: 心血管

流式细胞DNA分析检查简介

流式细胞DNA分析是可以研究间期细胞,并不受细胞增殖状态的影响,对检测胸腔积液中的恶性细胞的有重要意义的一种检查方法。流式细胞仪的检测范围:1.流式细胞仪可以检测细胞结构,包括:细胞大小、细胞粒度、细胞表面面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、RNA含量、蛋白质含量。2.流式细胞仪可以检测细胞功能,包括:细胞表面/胞浆/核的特异性抗原、细胞活性、细胞内细胞因子、酶活性、激素结合位点和细胞受体。

流式细胞DNA分析检查过程

流式细胞DNA分析:直接用可产生荧光的核酸染料(如碘化丙啶)对胸水中细胞进行染色,流式细胞仪分析胸水细胞的DNA含量、细胞周期分布和DNA倍体数.

流式细胞术常规检测时的样品制备:

(一)直接免疫荧光标记法

取一定量细胞(约1X106细胞/ml),直接加入连接有荧光素的抗体进行免疫标记反应(如做双标或多标染色,可把几种标记有不同荧光素的抗体同时加入),孵育20~60分钟后,用PBS(pH7.2~7.4)洗1~2次,加入缓冲液重悬,上机检测。本方法操作简便,结果准确,易于分析,适用于同一细胞群多参数同时测定。虽然直标抗体试剂成本较高,但减少了间接标记法中较强的非特异荧光的干扰,因此更适用于临床标本的检测。

(二)间接免疫荧光标记法

取一定量的细胞悬液(约1X106细胞/ml),先加入特异的第一抗体,待反应完全后洗去未结合抗体,再加入荧光标记的第二抗体,生成抗原-抗体-抗抗体复合物,以FCM检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。本方法费用较低,二抗应用广泛,多用于科研标本的检测。但由于二抗一般为多克隆抗体,特异性较差,非特异性荧光背景较强,易影响实验结果。所以标本制备时应加入阴性或阳性对照。另外,由于间标法步骤较多,增加了细胞的丢失,不适用测定细胞数较少的标本。

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