北京中科白癜风医院
其他皮肤病医院国营
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1、制备细胞悬液
对于悬液培养的细胞,可直接进行下面的步骤2(计数与计算过程)。如果计数对象为贴壁生长的细胞,首先需将培养物制备成细胞悬液。
1)终止培养,将培养液吸出,用PBS洗培养物一次。
2)给培养瓶内加入1ml0.25%胰蛋白酶溶液,于37℃消化3~5min。期间不断在镜下观察。当细胞变圆接近脱壁时,弃消化液。
3)加入一定量的培养液(如果这些培养细胞不再有用,可加PBS),用吸管吹打,使细胞脱壁而制成细胞悬液。
2、计数与计算过程
1)在细胞计数板中央放置计数专用的盖玻片。
2)用玻璃虹吸管吸取细胞,让虹吸管在盖玻片上或下侧的计数板凹蹧处流出悬液,至盖玻片被液体充满为止。
3)置显微镜下计数四角大方格内的细胞总数。
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