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酶联合吸附测定

基本信息

  • 专科分类： 生长发育检查
  • 检查分类： 生化检查
  • 适用性别： 男女均适用
  • 是否空腹： 　空腹
  • 手术参考价： 25元
  • 科　室： 生长发育检查

酶联合吸附测定检查简介

酶联免疫吸附试验(以下简称ELISA)：是酶免疫测定技术中应用最广的技术。用于检测包被于固相板孔中的待测抗原(或抗体)。即用酶标记抗体，并将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使抗原抗体反应在固相载体表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗除，最后通过酶作用于底物后显色来判断结果。

酶联合吸附测定检查过程

常用的ELISA法有双抗体夹心法和间接法，前者用于检测大分子抗原，后者用于测定特异抗体。

1.间接ELISA

本法主要用于检测抗体。间接ELISA的操作程序如下。

(1)材料

①包被液、洗涤液、保温液、底物液、终止液;

②DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参考血清.

③ELISA检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。

(2)方法步骤

①加抗原包被→4℃过夜，洗涤三次、抛干

②加待检血清→37℃2小时，洗涤三次、抛干

③加酶标抗体→37℃2小时，洗涤三次、抛干

④加底物液→37℃30分钟，加终止液

⑤用ELISA检测仪测定OD值，并计算出P/N比值。

2.双抗体夹心ELISA

本法主要用于检测大分子抗原。

①加抗体包被→4℃过夜，洗涤三次、抛干

②加待检抗原→37℃30分钟，洗涤三次、抛干

③加酶标抗体→37℃30分钟，洗涤三次、抛干

④加底物液→37℃15分钟，加终止液

⑤用ELISA检测仪测定OD值。

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