α-羟丁酸脱氢酶

α-羟丁酸脱氢酶注意事项

(1)比色法:

①Rosalki及Wilkinson建立的α-HBDH测定方法是30℃的连续监测法,以国际单位(U/L)计算。上述方法是37℃比色法,为使各方法间结果有更好的可比性,可转换成30℃连续监测法的相应单位。37℃转换成30℃温度系数为0.87。

②因红细胞内该酶活性高,应在2h内及时分离血清,标本不能溶血。4℃酶活性稳定不少于7天。

③可用EDTA(1mg/ml)、肝素(0.2mg/ml)抗凝血浆,草酸盐、枸橼酸钠、氟化物抗凝剂可抑制该酶活性。

(2)连续监测法:

①此法是1980年由英国临床化学协会(ACB)推荐,其最适底物浓度为15mmol/L(25℃),反应混合物的最终浓度:磷酸盐65.4mmol/L、NADH0.2mmol/L、α-酮丁酸3.3mmol/L,样品容积组分比0.023。改为37℃测定结果与LDH相关性较好。

②α-酮丁酸钠较稳定,α-酮丁酸长期存放,其缩合物可抑制酶促反应。

③国内商品试剂盒的方法,一般是在操作前将α-酮丁酸与NADH溶液混合,置反应温度条件下数分钟后,作为单一试剂取出一定量加入样品中,延迟时间30s后,监测3min。

α-羟丁酸脱氢酶不宜人群

无。

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