北京中科白癜风医院
其他皮肤病医院国营
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取材:血液
血清C1q的测定原理:同免疫单扩散试验。
试剂:
(1)抗C1q血清:自制抗C1q血清应预试选定最适稀释度;商品抗血清按说明书使用。
(2)含0.01mol/L:EDTA-Na2的0.025mol/LpH8.2巴比妥钠HCl缓冲液巴比妥钠2.38g,NaN30.4g,EDTA-Na20.7g,蒸馏水300ml,溶后加入1.17mol/LHCl(浓HCl1.93ml,加蒸馏水18.1ml)2.75ml,用HCl调pH为8.2,补加蒸馏水至426.5ml。
(3)20.0g/L琼脂糖或24.0g/L琼脂:用上述缓冲液(也可用含EDTA-Na2的pH7.2PBS或生理盐水)配制。分装每管4ml。
操作方法:
(1)将抗C1q血清按效价用含0.1g/L硫柳汞生理盐水稀释成总量4ml,56℃水浴预温后与融化并冷至56℃的20.0g/L琼脂糖(24.0g/L琼脂)混匀。浇注6cm×8cm板,打孔,每孔加不稀释被检血清10μl37℃湿室扩散48h。其余操作同免疫球蛋白单扩散法测定。
(2)标准曲线制备将已知C1q含量的参考标准血清作1∶2,1∶3,1∶4,1∶6,1∶8稀释后制备标准曲线(具体操作同免疫球蛋白单扩散法测定)。
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