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硝基四唑氮蓝试验

基本信息

  • 专科分类：
  • 检查分类： 免疫检查
  • 适用性别： 男女均适用
  • 是否空腹： 　空腹
  • 手术参考价： 35元
  • 科　室：

硝基四唑氮蓝试验检查简介

中性粒细胞在杀菌过程中能量消耗增加，代谢中所脱的氢还原氮蓝四唑成为蓝黑色的点状或块状物，沉积于粒细胞胞质中，根据细胞内沉积颗粒判断阳性率。本试验主要用于检测中性粒细胞的胞内杀伤功能，可以用于诊断儿童慢性肉芽肿病，以及用于鉴别细菌性和病毒性感染。

硝基四唑氮蓝试验检查过程

取材：血液

硝基四唑氮蓝试验的测定原理：中性粒细胞在杀菌过程中能量消耗骤增、糖代谢活跃、6-磷酸葡萄糖氧化脱氢成为戊糖。所脱的氢还原淡黄色的硝基蓝四氮唑（NBT）成为蓝黑色的点状或块状颗粒，沉积于中性粒细胞的胞浆中，其折光性很强，在油镜下很易识别。

试剂：

（1）2.0g/LNBT生理盐水溶液：取NBT20mg，加于10ml生理盐水中，置80℃水浴，搅拌溶解，先用滤纸过滤，再经G6除菌，分装，放4℃冰箱保存备用。试验前新鲜配制NBT应用液，取2.0g/LNBT生理盐水溶液加等量下述缓冲液，混合后即可。

（2）pH7.20.15mol/L磷酸葡萄糖生理盐水缓冲液：0.15mol/LNa2HPO4，70ml；0.15mol/LKH2PO4，30ml；葡萄糖100mg，混合溶解，过滤，分装，55.16kPa，高压灭菌20min，置冰箱保存。

操作方法：

（1）取肝素（100u/ml）抗凝血0.1ml放入凹玻片中，加NBT应用液0.1ml和NBT应用液0.1ml，混匀。置湿盒中，37℃15min（其间振摇1次）再移室温15min。

（2）取1滴混合液，推成薄片，晾干。

（3）用甲醇固定3min，吹干，加10.0g/L沙黄水溶液染色5min（也可用50.0g/L甲基绿水溶液染色15min，或用姬姆萨-瑞氏染液染色），水洗，晾干。

（4）用显微镜检查，凡中性粒细胞的胞浆内含有斑点状或块状深蓝色物质沉着的为NBT阳性细胞，细胞核有不同程度的退行性变，细胞有时肿大。共计数100～200个中性粒细胞，计其NBT阳性细胞百分率。

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