混合淋巴细胞培养试验

基本信息

专科分类： 生长发育检查
检查分类： 免疫检查
适用性别： 男女均适用
是否空腹： 　非空腹
手术参考价： 30元
科　室： 生长发育检查

混合淋巴细胞培养试验检查简介

混合淋巴细胞培养试验(mixedlymphocyteculture，MLC)是一种测定受体和供体主要组织相容性抗原(HLA抗原)相容程度的试验方法,常用于器官移植前的组织配型.混合淋巴细胞培养将供者与受者的淋巴细胞做双向混合培养，或者灭活供者的淋巴细胞做向混合培养，细胞反应的程度与供-受者相容的程度呈负相关的试验。

混合淋巴细胞培养试验检查过程

1、供体淋巴细胞的制备

新鲜外周静脉血按1∶1比例加在装有比重为1.077的淋巴细胞分离液的离心管中，轻稳加在液面上.2000r/min离心20min，吸取中间雾状淋巴细胞层.生理盐水洗涤2次.台盼蓝染色，计数板计数.调整细胞密度为2×109/L，分成3管，各自离心,留取沉淀.每管中加入250μL丝裂霉素(终浓度50mg/L)和1.75mL生理盐水，37℃水浴40min，生理盐水离心洗涤2次.用含100mL/L胎牛血清的RPMI1640液调整细胞密度为1×1010/L.加入抗体封闭抗原.标记为D

2、受体淋巴细胞的制备

新鲜外周静脉血按1∶1比例加在装有比重为1.077的淋巴细胞分离液的离心管中，轻稳加在液面上.2000r/min离心20min，吸取中间雾状淋巴细胞层.生理盐水洗涤2次.用含120mL/L胎牛血清的RPMI1640培养液调整细胞密度为1×1010/L.标记为R.

3、混合淋巴细胞培养

将已制备好的R和D按如下分组加入96孔板，置37℃，50mL/LCO2孵箱中培养24h.A组：R50μL+D50μL;B组：R50μL+D50μL+I纯化中和mAb15μL;C组：R50μL+IL?2纯化中和mAb15μL;D组：R50μL.每组3个复孔，空白对照组为RPMI1640培养液100μL.